MOLECULAR DIAGNOSTICS OF POTATO INFECTIONS WITH PVY AND PLRV BY IMMUNOCHROMATOGRAPHY
Abstract
Immunochromatography test systems were developed for molecular diagnostics of the potato virus Y and PLRV infection. To increase a low yield of PLRV and raise antibodies against the PLRV antigen, chimerical virus was constructed comprising the PLRV coat protein and recombinant RNA of a tobamovirus, in which capsid protein gene was replaced by the PLRV coat protein gene. Binary vector containing the DNA copy of the recombinant RNA was infectious, and yield of the chimerical virus increased up to 800 times in comparison with the WT PLRV. On the basis of experience in the development of the diagnostics of viral and viroid infections, a rational tactics is proposed for the mass laboratory and field diagnosis of viral infections on the molecular level.
About the Authors
O. A. Kondakova
Department of Virology, School of Biology, M.V. Lomonosov Moscow State University,
Leninskye gory 1–12, Moscow, 119234, Russia
Russian Federation
Russian Federation
K. O. Butenko
Department of Virology, School of Biology, M.V. Lomonosov Moscow State University,
Leninskye gory 1–12, Moscow, 119234, Russia
Russian Federation
Russian Federation
E. V. Skurat
Department of Virology, School of Biology, M.V. Lomonosov Moscow State University, Leninskye gory 1–12, Moscow, 119234, Russia
Russian Federation
Russian Federation
Yu. F. Drygin
A.N. Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Leninskiye gory 1–40, Moscow, 119992, Russia
Russian Federation
Russian Federation
References
1. Дрыгин Ю.Ф. Детекция целевой последовательности нуклеотидов и целевого антигена // 8-я Всероссийская научно-практическая конференция “Молекулярная диагностика 2014” / М: МБА, 2014. C. 126.
2. Drygin Yu.F., Chirkov S.N., Kondakova O.A., Zinovkin R.A., Ivanov P.A., Blintsov A.N., Gavryushina E.S., Zherdev A.V., Byzova N.A., Dzantiev B.B., Atabekov J.G. Highsensitive technologies for molecular diagnostics of potato virus and viroid infections // Potato Production and Innovative Technologies / Eds. A.J. Haverkort and B.V. Anisimov. Wageningen: Acad. Publishers, 2007. P. 274–285.
3. Кондакова О.А., Дрыгин Ю.Ф. Диагностика вироидного заболевания картофеля зондами (диен)Pt-ДНК // Биотехнология. 1999. № 4. С. 83–90.
4. Дрыгин Ю.Ф., Кондакова О.А., Чирков С.Н., Зиновкин Р.А., Киселева В.И., Атабеков И.Г. Способ одновременного обнаружения множества РНК-последовательностей в биологическом образце. Международный патент #WO/2009/123494.
5. Takanami Y., Kubo S. Enzyme-assisted purification of two phloem-limited plant viruses: tobacco necrotic dwarf and potato leafroll // J. Gen. Virol. 1979. Vol. 44. N 1. P. 153–159.
6. Weller M.G. Immunochromatographic techniques — a critical review // Fresen. J. Anal. Chem. 2000. Vol. 366. N 6. P. 635–645.
7. Posthuma-Trumpie T., Korf J., van Amerongen A. Lateral flow (immuno) assay: its strengths, weaknesses, opportunities and threat. A literature survey // Anal. Bioanal. Chem. 2008. Vol. 393. N 2. P. 569–582.
8. Zhang G., Guo J., Wang X.. Immunochromatographic lateral flow strip tests // Biosensors and Biodetection. Methods and Protocols / Eds. A. Rasooly and K.E. Herold. NY: Humana Press, 2009. P. 169–183.
9. Wong R., Tse H. Lateral flow immunoassay. NY: Humana Press, 2009. 223 p.
10. Dzantiev B.B., Byzova N.A., Urusov A.E., Zherdev A.V. Immunochromatographic methods in food analysis // Trends Anal. Chem. 2014. Vol. 55. P. 81–93.
11. Drygin Y.F., Blintsov A.N., Osipov A.P., Grigorenko V.G., Andreeva I.P., Uskov A.I., Varitsev Y.A., Anisimov B.V., Novikov V.K., Atabekov J.G. High-sensitivity express immunochromatographic method for detection of plant infection by tobacco mosaic virus // Biochemistry (Mosc.). 2009. Vol. 74. N 9. P. 986–993.
12. Drygin Yu. F., Blintsov A N., Grigorenko, V.G., Andreeva I.P., Osipov A.P., Varitzev Y.A., Uskov A.I., Kravchenko D.V., Atabekov J.G. High sensitive field test lateral flow immunodiagnostics of PVX infection // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2012. Vol. 93. N 1. P. 179–189.
13. Егоров А.М., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая школа, 1991. С. 288.
14. Дрыгин Ю.Ф., Скурат Е.В., Кондакова О.А., Атабеков И.Г., Бутенко К.О. Способ получения препаративных количеств вирусных частиц флоэмно-ограниченных вирусов. Патент РФ: 2555534 от 08.06.2015 г.
15. Дрыгин Ю.Ф. Стратегия и тактика молекулярной диагностики инфекций картофеля на практике // Второе научно-практическое совещание “Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля”. М.: МГУ, 2012. С. 10–11.
16. Бутенко К.О., Скурат Е.В., Кондакова О.А., Варицев Ю.А., Гаврюшина Е.С., Дрыгин Ю.Ф., Атабеков И.Г. Полевой метод диагностики инфекции картофеля вирусом скручивания листьев на тест-полосках с антителами к химерному вирусу // Защита картофеля. 2014. Т. 1. № 1. С. 35–36.
Review
For citations:
Kondakova O.A., Butenko K.O., Skurat E.V., Drygin Yu.F. MOLECULAR DIAGNOSTICS OF POTATO INFECTIONS WITH PVY AND PLRV BY IMMUNOCHROMATOGRAPHY. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya. 2016;(1):46-51. (In Russ.)
Views:
352
Email this article 