Preview

Вестник Московского университета. Серия 16. Биология

Расширенный поиск

ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ ШИРО- КО НЕЙТРАЛИЗУЮЩЕГО АНТИТЕЛА ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА ТИПА А

Полный текст:

Аннотация

Для исследования возможности создания на основе широко нейтрализующего антитела против вируса гриппа А различных белковых конструкций для диагностики было проведено конструирование двух рекомбинантных белков — Fab-фрагмента антитела и белка Fab-mCherry, представляющего собой гибрид Fab-фрагмента и флуоресцентного белка mCherry. Оба белка были экспрессированы в клетках Escherichia coli и выделены в функционально активном состоянии из культуральной жидкости. Показано, что Fabфрагмент антитела взаимодействует со всеми одиннадцатью протестированными штаммами подтипов H1N1 и H3N2 вируса гриппа А. При этом наибольшая сила связывания наблюдается в отношении штаммов подтипа H1N1, что соответствует иммунохимическому профилю “родительского антитела”. Сравнение констант диссоциации комплексов Fab-фрагмента антитела и белка Fab-mCherry с вирусными частицами штамма A(H1N1)/Solomon Islands/03/06 показало, что присоединение белка mCherry не влияет на антиген-связывающие свойства Fab-фрагмента антитела.

Об авторах

Т. К. Алиев
Кафедра химической энзимологии, химический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 3
Россия

науч. сотр. кафедры химической энзимологии химического факультета МГУ. Тел.: 8-495-330-66-38



И. Г. Дементьева
Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения; Россия, 117638, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8
Россия

ст. науч. сотр. Всероссийского научного центра молекулярной диагностики и лечения. Тел.: 8-499-613-23-65



В. А. Топорова
Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; Россия, 117997, г. Москва, ГСП-7, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10
Россия

мл. науч. сотр. Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Тел.: 8-495-330-66-38



М. Н. Боков
Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения; Россия, 117638, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8
Россия

науч. сотр. Всероссийского научного центра молекулярной диагностики и лечения. Тел.: 8-499-613-23-65



Л. П. Позднякова
Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения; Россия, 117638, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8
Россия

науч. сотр. Всероссийского научного центра молекулярной диагностики и лечения. Тел.: 8-499-613-23-65



В. С. Рыбченко
кафедра биохимии биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12
Россия

студент биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-330-66-38



Д. А. Долгих
кафедра биоинженерии, биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12
Россия

докт. биол. наук, проф. кафедры биоинженерии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-336-80-11



П. Г. Свешников
Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения; Россия, 117638, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8
Россия

докт. биол. наук, проф., генеральный директор Всероссийского научного центра молекулярной диагностики и лечения. Тел.: 8-499-613-23-65



М. П. Кирпичников
кафедра биоинженерии, биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12
Россия

академик РАН, проф., докт. биол. наук, декан, зав. кафедрой биоинженерии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-939-27-76



Список литературы

1. Graham-Rowe D. Epidemiology: Racing against the flu // Nature. 2011. Vol. 480. N 7376. P. S2–S3.

2. Wrammert J., Koutsonanos D., Li G.M. et al. Broadly cross-reactive antibodies dominate the human B cell response against 2009 pandemic H1N1 influenza virus infection // J. Exp. Med. 2011. Vol. 208. N 1. P. 181–193 (Erratum in: J. Exp. Med. 2011. Vol. 208. N 2. P. 411).

3. Corti D., Voss J., Gamblin S.J. et. al. A neutralizing antibody selected from plasma cells that binds to group 1 and group 2 influenza A hemagglutinins // Science. 2011. Vol. 333. N 6044. P. 850–856.

4. Деев С.М., Лебеденко Е.Н. Современные технологии создания неприродных антител для клинического применения // Acta Naturae. 2009. Т. 1. № 1. С. 32–50.

5. Shaner N.C., Campbell R.E., Steinbach P.A., Giepmans B.N., Palmer A.E., Tsien R.Y. Improved monomeric red, orange and yellow fluorescent proteins derived from Discosoma sp. red fluorescent protein // Nat. Biotechnol. 2004. Vol. 22. N 12. P. 1567–1572.

6. Kalinichenko A.A., Toporova V.A., Panina A.A., Aliev T.K., Kryukova E.A., Shemchukova O.B., Solopova O.N., Pozdnyakova L.P., Sveshnikov P.G., Dolgikh D.A., Kirpichnikov M.P. Development and characterization of antibodies against aflatoxins // Russ. J. Bioorg. Chem. 2010. Vol. 36. N 1. P. 122–132.

7. Larina M.V., Aliev T.K., Solopova O.N., Pozdnyakova L.P., Korobova S.V., Yakimov S.A., Sveshnikov P.G., Dolgikh D.A., Kirpichnikov M.P. Neutralizing monoclonal and chimeric antibodies to human interferon-γ // Russ. J. Bioorg. Chem. 2015. Vol. 41. N 3. P. 316–326.

8. Studier F. W. Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures // Protein Expr. Purif. 2005. Vol. 41. N. 1. P. 207–234.

9. Friguet B., Chaffotte A.F., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. Measurements of the true affinity constant in solution of antigen-antibody complexes by enzyme-linked immunosorbent assay // J. Immunol. Methods. 1985. Vol. 77. N 2. P. 305–319.

10. Klotz I.M. // The Proteins. Vol. 1. / Eds. I.M. Klotz, H. Neurath, and K. Bailey. N.Y.: Academic Press, 1953. 727 p.

11. Gross L.A., Baird G.S., Hoffman R.C., Baldridge K.K., Tsien R.Y. The structure of the chromophore whithin DsRed, a red fluorescent protein from coral // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. Vol. 97. N 22. P. 11990–11995.

12. Feshchenko E., Rhodes D.G., Felberbaum R., McPherson C., Rininger J.A., Post P., and Cox M.M.J. Pandemic influenza vaccine: characterization of A/California/ 07/2009 (H1N1) recombinant hemagglutinin protein and insights into H1N1 antigen stability // BMC Biotechnology. 2012. Vol. 2012. DOI: 10.1186/1472-6750-12-77.


Для цитирования:


Алиев Т.К., Дементьева И.Г., Топорова В.А., Боков М.Н., Позднякова Л.П., Рыбченко В.С., Долгих Д.А., Свешников П.Г., Кирпичников М.П. ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ ШИРО- КО НЕЙТРАЛИЗУЮЩЕГО АНТИТЕЛА ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА ТИПА А. Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. 2016;(2):25-31.

For citation:


Aliev T.K., Dement’yeva I.G., Toporova V.A., Bokov M.N., Pozdnyakova L.P., Rybchenko V.S., Dolgikh D.A., Sveshni kov P.G., Kirpichnikov M.P. DEVELOPMENT AND PROPERTIES OF RECOMBINANT PROTEINS BASED ON THE BROADLY NEUTRALIZING ANTIBODY TO INFLUENZA A VIRUS. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya. 2016;(2):25-31. (In Russ.)

Просмотров: 216


ISSN 0137-0952 (Print)