Получение и стабильность комплексного препарата протеиназ Aspergillus ochraceus L-1 с фибринолитической и антикоагулянтной активностью
Аннотация
Из культуральной жидкости микромицета Aspergillus ochraceus L-1 высаливанием сульфатом аммония с последующими диализом и депигментацией на фенолоанилинформальдегидной смоле при рН буфера 8,2 был получен комплексный препарат протеолитических ферментов с удельной плазминоподобной активностью не менее 890 ЕpNA/мг и удельной активаторной к протеину С активностью не менее 130 ЕpNA/мг. Сравнение полученного препарата по казеинолитической, фибринолитической, фибриногенолитической и плазминоподобной активности с коммерческими аналогами – террилитином, трипсином и стрептокиназой – показало его перспективность для использования в качестве средства для разжижения гнойно-ожоговых ран и фибриновых сгустков. Полученный комплексный препарат протеиназ имел высокую стабильность при хранении в условиях отрицательных температур сроком до 9 мес.
Об авторах
А. А. Осмоловский
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова
Россия
Россия
Осмоловский Александр Андреевич – канд. биол. наук, доц. кафедры микробиологии биологического факультета
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, тел.: 8-495-939-30-33
А. В. Орехова
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; La Sapienza” University of Rome
Россия
Россия
Орехова Анастасия Владимировна – вед. инженер кафедры микробиологии биологического факультета
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, тел.: 8-495-939-30-33
Piazzale Aldo Moro, 5, Rome, 00185, Italy
Э. Конти
“La Sapienza” University of Rome
Италия
Италия
Конти Элеонора (Eleonora Conti) - магистр университета «Ла Сапиенца»
Piazzale Aldo Moro, 5, Rome, 00185, Italy, тел.: +39 06 4991 2791
В. Г. Крейер
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова
Россия
Россия
Крейер Валериана Георгиевна - канд. биол. наук, ст. науч. сотр. кафедры микробиологии биологического факультета
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, тел.: 8-495-939-30-33
Н. А. Баранова
Lomonosov Moscow State University
Россия
Россия
Баранова Нина Андреевна - канд. биол. наук, ст. науч. сотр. кафедры микробиологии биологического факультета
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, тел.: 8-495-939-30-33
Н. С. Егоров
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова
Россия
Россия
Егоров Николай Сергеевич - докт. биол. наук, проф. Международного биотехнологического центра
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, тел.: 8-495-939-30-33
Список литературы
1. Razzaq A., Shamsi S., Ali A., Ali Q., Sajjad M., Malik A., Ashraf M. Microbial proteases applications // Front. Bioeng. Biotechnol. 2019. Vol. 7: 110.
2. dos Santos Aguilar J.G., Sato H.H. Microbial proteases: production and application in obtaining protein hydrolysates // Food Res. Int. 2018. Vol. 103. P. 253–262.
3. Kotb E. The biotechnological potential of fibrinolytic enzymes in the dissolution of endogenous blood thrombi // Biotechnol. Prog. 2014. Vol. 30. N 3. P. 656–672.
4. Sharkova T.S., Kurakov A.V., Osmolovskiy A.A., Matveeva E.O., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Screening of producers of proteinases with fibrinolytic and collagenolytic activities among micromycetes // Microbiology. 2015. Vol. 84. N 3. P. 359–364.
5. Шамрайчук И.Л., Лавренова В.Н., Белозерский М.А., Кураков А.В., Белякова Г.А., Дунаевский Я.Е. Активность и спектр внеклеточных пептидаз у фитопатогенных микромицетов Fusarium anguioides и F. sambucinum // Микол. фитопатол. 2016. Т. 50. № 4. С. 250–256.
6. Kotb E., Helal G.E.-D.A., Edries F.M. Screening for fibrinolytic filamentous fungi and enzymatic properties of the most potent producer, Aspergillus brasiliensis AUMC 9735 // Biologia. 2015. Vol. 70. N 12. P. 1565–1574.
7. Osmolovskiy A.A., Kurakov A.V., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Ability of extracellular proteinases of micromycetes Aspergillus flavipes, Aspergillus fumigatus and Aspergillus sydowii to affect proteins of the human haemostatic system // Moscow Univ. Biol. Sci. Bull. 2017. Vol. 72. N 1. P. 20–24.
8. Osmolovskiy A.A., Zvonareva E.S., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Secretion of proteinases with fibrinolytic activity by micromycetes of the genus Aspergillus // Moscow Univ. Biol. Sci. Bull. 2018. Vol. 73. N 1. P. 39–42.
9. Осмоловский А.А., Крейер В.Г., Кураков А.В., Баранова Н.А., Пискункова Н.Ф., Егоров Н.С. Микромицеты Aspergillus flavus и A. oryzae как продуценты протеиназ - активаторов белков системы гемостаза человека // Микол. фитопатол. 2019. Т. 53. № 3. С. 183–185.
10. Shilpa H.K., Ambekar J.G., Dongre N.N., Siddalingeshwara K.G. Application of fibrinolytic enzyme from Aspergillus tamarii – in vitro studies // Eur. J. Pharm. Med. Res. 2019. Vol. 6. N 12. P. 560–562.
11. Craik C.S., Page M.J., Madison E.L. Proteases as therapeutics // Biochem. J. 2011. Vol. 435. N 1. P. 1–16.
12. Chanalia P., Gandhi D., Jodha D., Singh J. Applications of microbial proteases in pharmaceutical industry: an overview // Rev. Med. Microbiol. 2011. Vol. 22. N 4. P. 96–101.
13. Kumar L., Jain S.K. Proteases: a beneficial degradative enzyme in therapeutic applications // Int. J. Sci. Res. Biol. Sci. 2018. Vol. 5. N 4. P. 114–118.
14. Osmolovskiy A.A., Rukavitsyna E.D., Kreier V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Production of proteinases with fibrinolytic and fibrinogenolytic activity by a micromycete Aspergillus ochraceus // Microbiology. 2017. Vol. 86. N 4. P. 512–516.
15. Osmolovskiy A.A., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Properties of extracellular plasmin-like proteases of Aspergillus ochraceus micromycete // Applied Biochem. Microbiol. 2017. Vol. 53. N 4. P. 429–434.
16. Osmolovskiy A.A., Orekhova A.V., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Possibility of application of extracellular proteases of the micromycete Aspergillus ochraceus VKM F-4104D for determination of the protein C content in human blood plasma // Biochem. (Moscow) Suppl. Ser. B. Biomed. Chem. 2018. Vol. 12. N 2. P. 164–166.
17. Komarevtsev S.K., Popova E.A., Kreyer V.G., Miroshnikov K.A., Osmolovskiy A.A. Purification of the protease activator of protein C of human blood plasma produced by the micromycete Aspergillus ochraceus VKM F-4104D // Applied Biochem. Microbiol. 2020. Vol. 56. N 1. P. 39–44.
18. Шатаева Л.К., Крейер В.Г., Покровская С.С., Радзявичус К.И., Самсонов Г.В. Влияние аминокислотного состава белка на его связывание с карбоксильными катионитами // Высокомол. соединения. 1985. Т. 27. № 1. С. 46–51.
19. Шатаева Л.К., Марина В.П., Радзявичус К.И., Мельникова С.К., Самсонов Г.В. Влияние набухания анионита ФАФ на его сорбционные свойства // Прикл. биохим. микробиол. 1982. Т. 18. № 1. С 65–70.
20. Batomunkueva B.P., Egorov N.S. Isolation, purification and resolution of the extracellular proteinase complex of Aspergillus ochraceus 513 with fibrinolytic and anticoagulant activities // Microbiology. 2001. Vol. 70. N 5. P. 519–522.
21. Belakhov V.V., Momot N.N. Development of novel sorption method of preparation of high-purified α-amylase for the creation of enzyme drugs // In the World of Scient. Discov. 2010. Vol. 6. N 1. P. 173–175.
22. Osmolovskiy A.A., Kreier V.G., Kurakov A.V., Baranova N.A., Egorov N. S. Aspergillus ochraceus micromycetes – producers of extracellular proteinases – protein C activators of blood plasma // Applied Biochem. Microbiol. 2012. Vol. 48. N 5. P. 488–492.
23. Osmolovskiy A.A., Popova E.A., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Fibrinolytic and collagenolytic activity of extracellular proteinases of the strains of micromycetes Aspergillus ochraceus L-1 and Aspergillus ustus 1 // Moscow Univ. Biol. Sci. Bull. 2016. Vol. 71. N 1. P. 62–66.
24. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem. 1976. Vol. 72. N 1–2. P. 248–254.
25. Lagashetti A.C., Dufossé L., Singh S.K., Singh P.N. Fungal pigments and their prospects in different industries // Microorganisms. 2019. Vol. 7. N 12: 604.
26. Osmolovskiy A.A., Kreyer V.G., Baranova N.A., Kurakov A.V., Egorov N.S. Properties of extracellular proteinase – an activator of protein C in blood plasma formed by Aspergillus ochraceus // Applied Biochem. Microbiol. 2015. Vol. 51. N 1. P. 95–101.
27. Kotb E. Purification and partial characterization of serine fibrinolytic enzyme from Bacillus megaterium KSK-07 isolated from Kishk, a traditional Egyptian fermented food // Applied Biochem. Microbiol. 2015. Vol. 51. N 1. P. 34–43.
Рецензия
Для цитирования:
Осмоловский А.А., Орехова А.В., Конти Э., Крейер В.Г., Баранова Н.А., Егоров Н.С. Получение и стабильность комплексного препарата протеиназ Aspergillus ochraceus L-1 с фибринолитической и антикоагулянтной активностью. Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. 2020;75(3):158-163.
For citation:
Osmolovskiy A.A., Orekhova A.V., Conti E., Kreyer V.G., Baranova N.A., Egorov N.S. Production and stability of a complex prepatation of proteinases by Aspergillus ochraceus L-1 with fibrinolytic and anticoagulant activity. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya. 2020;75(3):158-163. (In Russ.)
Просмотров:
463
Послать статью по эл. почте 