НОВЫЙ ФИТОВИРУСНЫЙ ВЕКТОР ДЛЯ СУПЕРЭКСПРЕССИИ ЦЕЛЕВЫХ БЕЛКОВ В РАСТЕНИИ
Аннотация
Ранее нами был получен новый вирусный вектор на основе генома вируса мозаики альтернантеры штамма MU, ген целевого белка в составе которого находился под контролем двух субгеномных промоторов. Вирусный вектор обеспечивал суперэкспрессию белка оболочки и ряда целевых белков медицинского назначения в листьях Nicotiana benthamiana. В настоящей работе с целью увеличения продукции целевого белка вирусный вектор был модифицирован и ген белка оболочки поставлен под контроль трех субгеномных промоторов. Полученный вирусный вектор (AltMV triple1) также обеспечивал суперэкспрессию целевого белка в агроинъецированных листьях. Содержание целевого белка составляло более 50% от всего растворимого белка клетки. Проведено сравнение эффективности экспрессии целевого белка в листьях Nicotiana benthamiana, трансформированных вирусными векторами, содержащими два и три субгеномных промотора потексвирусов.
Об авторах
Е. В. ПутляевРоссия
аспирант 2-го года кафедры вирусологии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-903-184-51-40
А. А. Смирнов
Россия
канд. биол. наук, ст. преподаватель кафедры вирусологии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-916-939-81-93, 8-495-939-33-47
Е. А. Лазарева
Россия
канд. биол. наук, ст. науч. сотр. кафедры вирусологии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-939-53-67
Г. В. Клинк
Россия
аспирантка 1-го года биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-939-33-47
О. В. Карпова
Россия
докт. биол. наук, проф. кафедры вирусологии биологического факультета МГУ. Тел.: 8-495-939-53-67
И. Г. Атабеков
Россия
докт. биол. наук, акад. РАН, зав. кафедрой вирусологии биологического факультета МГУ, НИИ ФХБ им. A.Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова. Тел.: 8-495-939-53-67
Список литературы
1. Crommelin D.J., Storm G., Verrijk R., Leede L., Jiskoot W., Hennink W.E. Shifting paradigms: biopharmaceuticals versus low molecular weight drugs // Inter. J. Pharm. 2003. Vol. 266. N 1—2. P. 3—16.
2. Lico C., Chen Q., Santi L. Viral vectors for production of recombinant proteins in plants // J. Cell Physiol. 2008. Vol. 216. N 2. P. 366—377.
3. Gleba Y., Klimyuk V., Marillonnet S. Viral vectors for the expression of proteins in plants // Curr. Opin. Biotechnol. 2007. Vol. 18. N 2. P. 134—141.
4. Sambrook J., Russel D. Molecular cloning: A laboratory manual. N.Y.: CSHL Press, 2001.
5. Zvereva A.S., Petrovskaya L.E., Rodina A.V., Frolova O.Y., Ivanov P.A., Shingarova L.N., Komarova T.V., Dorokhov Y.L., Dolgikh D.A., Kirpichnikov M.P., Atabekov J.G. Production of biologically active human myelocytokines in plants // Biochemistry (Mosc). 2009. Vol. 74. N 11. P. 1187—1194.
6. Mukhamedzhanova A.A., Smirnov A.A., Arkhipenko M.V., Ivanov P.A., Chirkov S.N., Rodionova N.P., Karpova O.V., Atabekov J.G. Characterization of Alternanthera mosaic virus and its Coat Protein // Open Virol. J. 2011. Vol. 5. P. 136—140.
7. Hammond J., Reinsel M.D., Maroon-Lango C.J. Identification and full sequence of an isolate of Alternanthera mosaic potexvirus infecting Phlox stolonifera // Arch. Virol. 2006. Vol. 151. N 3. P. 477—493.
8. Ivanov P.A., Mukhamedzhanova A.A., Smirnov A.A., Rodionova N.P., Karpova O.V., Atabekov J.G. The complete nucleotide sequence of Alternanthera mosaic virus infecting Portulaca grandiflora represents a new strain distinct from phlox isolates // Virus Genes. 2010. Vol. 42. N 2. P. 268—271.
9. Voinnet O., Rivas S., Mestre P., Baulcombe D. An enhanced transient expression system in plants based on suppression of gene silencing by the p19 protein of tomato bushy stunt virus // Plant J. 2003. Vol. 33. P. 949—956.
10. Sempere R.N., Gуmez P., Truniger V., Aranda M.A. Development of expression vectors based on pepino mosaic virus // Plant Methods. 2011. Vol. 7. N 6.
11. Chapman S., Kavanagh T.A., Baulcombe D.C. Potato virus X as a vector for gene expression in plants // Plant J. 1992. Vol. 2. N 4. P. 549—557.
12. Singh P., Gonzalez M.J., Manchester M. Viruses and their uses in nanotechnology // Drug develop. res. 2006. Vol. 67. N 1. P. 23—41.
13. Leclerc D., Beauseigle D., Denis J., Morin H., Pare C., Lamarre A., Lapointe R. Proteasome-independent major histocompatibility complex class I cross-presentation mediated by papaya mosaic virus-like particles leads to expansion of specific human T cells // J. Virol. 2007. Vol. 81. P. 1319—1326.
14. Lim H.S., Vaira A.M., Reinsel M.D., Bae H., Bailey B.A., Domier L.L., Hammond J. Pathogenicity of Alternanthera mosaic virus is affected by determinants in RNA-dependent RNA polymerase and by reduced efficasy of silencing suppression in a movement-competent TGB1 // J. Gen. Virol. 2010. Vol. 91. N 1. P. 277—287.
Для цитирования:
Путляев Е.В., Смирнов А.А., Лазарева Е.А., Клинк Г.В., Карпова О.В., Атабеков И.Г. НОВЫЙ ФИТОВИРУСНЫЙ ВЕКТОР ДЛЯ СУПЕРЭКСПРЕССИИ ЦЕЛЕВЫХ БЕЛКОВ В РАСТЕНИИ. Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. 2013;(3):17-22.
For citation:
Putlyaev E.V., Smirnov A.A., Lazareva E.A., Klink G.V., Karpova O.V., Atabekov I.G. NEW PHYTOVIRAL VECTOR FOR SUPEREXPRESSION OF TARGET PROTEINS IN PLANTS. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya. 2013;(3):17-22. (In Russ.)
Просмотров: 83
Послать статью по эл. почте 