ЛОМОНОСОВ-2010
Исследовано влияние инкапсулирования в гелевую оболочку сегментов изолированно растущих pRi Т-ДНК трансформированных корней лекарственного растения шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) на морфологические, анатомические, физиологические и биохимические параметры корневых культур, возобновляемых из так называемых “искусственных семян” (ИС). Полученные ИС сохраняли жизнеспособность после длительного хранения при температуре +4°. С помощью инкапсулирования было проведено обновление и оздоровление корневой культуры шлемника. При изучении анатомических особенностей культуры корней, возобновленной из ИС, было отмечено формирование хлоропластов в клетках корней, культивируемых в условиях освещения. Определено общее количество хлорофилла и соотношение хлорофиллов a и b, а также содержание флавонов в зеленых корнях.
Раздельнолепестность Rhododendron tomentosum является результатом вторичной редукции. Наши данные подтверждают сведения P. Leins [1] о том, что рудиментарная трубка венчика возникает на ранних стадиях морфогенеза. У Empetrum подобные рудименты нами не обнаружены. Раздельнолепестность Empetrum может быть как первичным состоянием, так и результатом глубокой перестройки общего плана строения цветка. Близкие представите- ли базальных астерид имеют спайнолепестность разных типов конгенитального срастания. У Phyllodoce caerulea тип позднего срастания, у Loiseleuria procumbens — раннего, в то время как тип спайнолепестности маркирует крупные клады высших астерид.
Таксономический статус, происхождение и родственные связи различных форм алтайского волка остаются дискуссионными. Нами была разработана и протестирована методика проведения микросателлитного анализа, который является одним из основных инструментов филогеографических исследований. Было проанализировано 97 экземпляров волка (Canis lupus) из равнинно-степных, предгорных лесостепных и горно-таежных популяций Алтайского края и Республики Алтай. Микросателлитные локусы, выбранные в качестве генетических маркеров, показали высокую эффективность. Согласно нашим исследованиям, которые также подтверждаются литературными данными, лесостепная популяция волка Алтая является частью горно-таежной популяции (Canis lupus altaicus).
В данной работе с использованием конфокальной микроскопии были исследованы спонтанные и вызванные глутаматом изменения внутриклеточного Са2+ в астроцитах переживающих срезов гиппокампа крыс на различных стадиях онтогенеза.
Данная работа посвящена изучению влияния последовательностей, прилегающих к гену 4,5SH РНК мыши, на его транскрицию РНК-полимеразой III. Ген 4,5SH РНК содержит внутренний промотор, однако мы обнаружили, что различные 5ґ-прилегающие последовательности могут как ингибировать его транскрипцию, так и обеспечивать ее высокую эффективность в системе in vitro. Требования к структуре фланкирующих ген последовательностей в живой клетке оказались выше — только 5ґ-прилегающая последовательность из генома мыши оказалась способна обеспечивать эффективную транскрипцию гена 4,5SH РНК.
Установлено, что культуральные фильтраты дереворазрушающих базидиомицетов белой гнили Bjerkandera adusta BIMF-260 и Pleurotus ostreatus BIMF-247, полученные при твердо- фазном культивировании, обладают прооксидантной активностью, которая выражается в их способности инициировать реакции перекисного окисления полиненасыщенных жирных кис- лот, в частности линолевой кислоты. Прооксидантная активность, обнаруженная в культура- льных фильтратах грибов, зависит от наличия лигнинолитических ферментов, в первую оче- редь лигнинолитических пероксидаз.
Исследования автора показали, что можно дать достаточно точную антропологическую характеристику людей по портретам, выполненным художниками реалистического направления. По живописным портретам были выявлены антропологические типы русского дворянства и купечества середины XVIII — начала XIX в.
С помощью метода анализа информационной структуры (АНИС-метод) исследована информационная структура цитохрома с. На основе полученных данных сконструированы и получены варианты цитохрома с, несущие замены, направленные на понижение его способ- ности к взаимодействию с комплексами дыхательной цепи. Проведены исследования биоло- гической активности полученных мутантных вариантов цитохрома с в ходе взаимодействия с комплексами III и IV дыхательной цепи в системе митопластов печени крысы.
С помощью изотопного анализа исследована степень трофической дифференциации диплопод в таксоценах лесов умеренной и тропических зон. Изотопная дифференциация разных видов была существенно более выражена в тропическом лесу (23 вида диплопод, диапозон δ15N 10%), чем в широколиственном лесу умеренного климата (9 видов, диапозон δ15 N менее 3%). Эти данные позволяют предложить, что разделение пищевых ресурсов являются одним из механизмов поддержания высокого биоразнообразия первичных сапрофагов тропических систем.
Изучен полиморфизм генов ADH1B, ALDH2 и CYP2E1 в популяциях шорцев, русских Сибири и у потомков от смешанных шорско-русских браков. Выявлены достоверные различия между группами по частотам генотипов ADH1B, ALDH2 и аллелей ALDH2 и CYP2E1. Показан высокий уровень наблюдаемой гетерозиготности генов ADH1B и ALDH2. Генетические расстояния отражают близость метисов к шорцам (d = 0,005) и дистанцированность русских Сибири от русских Центральной России (d = 0,046).
Проводился сравнительный анализ переживания и развития тканевых и суспензионных нейротрансплантатов. Было показано, что тканевые трансплантаты значительно увеличиваются в размерах по сравнению со суспензионными. Клетки тканевых и суспензионных трансплантатов способны дифференцироваться в нейроны и глию. Также был показан реципрокный рост отростков трансплантата и реципиента.
Гены ДНК-метилтрансфераз системы рестрикции-модификации BspACI из Bacillus psychrodurans AC клонировали в клетках E. coli. Анализ аминокислотных последовательностей белков, кодируемых этими генами, показал, что они оба относятся к классу С5 ДНК-метилтрансфераз. Ген M1.BspACI субклонировали в составе экспрессирующего вектора pJW2. Препарат высокоочищенного рекомбинантного фермента получали с помощью хроматографии на различных носителях. Установлено, что M1.BspACI модифицирует первый цитозин в последовательности 5ґ-CCGC-3ґ. Определены кинетические параметры реакции метилирования ДНК ферментом и показано, что каталитическая константа оказалась равной 0,095 ± 0,002 мин–1, Km ДНК фага — 0,053 ± 0,007 мкМ, Km SAM — 5,1 ± 0,3 мкМ.
В работе охарактеризованы эффекты субстрата NO-синтазы (NOS) L-аргинина и классических ингибиторов NOS млекопитающих на биосинтез оксида азота (NO) у пробиотических бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3. С помощью флуоресцентного индикатора NO 1,2-диаминоантрахинона (DAA) показана индукция образования оксида азота экзогенным L-аргинином, что традиционно подтверждает NO-синтазное происхождение этого агента. Ни один из использованных ингибиторов трех различных изоформ NOS млекопитающих (L-NAME, L-NIL, nNOS ингибитор I) не оказывал существенного ингибирующего действия на NO-синтазную активность лактобацилл.